03.12.2013
Определение микотоксинов в зерне с помощью ROSA-тест
На протяжении уже длительного времени развитие животноводства в России сдерживает целый ряд негативных обстоятельств. Кроме экономических и природных, существуют такие факторы, которые очень быстро перестают быть частными и становятся общезначимыми. Это в полной мере относится к проблеме микотоксикоза. Это заболевание характерно для всех отраслей животноводства, так как основу рациона животных составляет зерно, являющееся основным источником микотоксинов..
Среди возбудителей болезней растений значительная часть относится к грибам, многие из которых образуют токсины, загрязняя ими продукты урожая. Вследствие приема зараженной пищи животные могут страдать токсикозом печени и почек, нарушением гормонального баланса, у них разрушаются нервная и кровеносная системы, снижается иммунитет.
Сегодня ученые, занимающиеся этой проблемой, в первую очередь разрабатывают и активно внедряют в повсеместное использование различные методы определения микотоксинов в образцах.
Традиционными методами определения микотоксинов являются физико-химические методы. Наибольшее распространение нашли различные методы жидкостной хроматографии с применением различных.
В настоящее время для определения микотоксинов в сельхозсырье используется иммуноферментный метод анализа (ИФА или ELISA). Из-за высокой чувствительности, быстроты, сравнительно низкой стоимости оборудования этот метод считается оптимальным.
Несколько лет назад компанией Charm (США) был разработан еще более быстрый метод определения микотоксинов, который называется ROSA-тест.
К преимуществам этого метода относятся: быстрота анализа пробы , универсальность , простота и удобство.
Сравнительная таблица методов ИФА и ROSA
|
Время анализа пробы
|
Предел обнаружения
|
Диапазон определения
|
Основное оборудование и реактивы
|
Афлатоксин
|
ИФА
|
25 мин.
|
4 ppb
|
4–40 ppb
|
Ридер, микротитровальный планшет, 8-канальная пипетка, таймер; стандартные растворы афлатоксина, коньюгат, субстрат, остановочный раствор
|
ROSA
|
10 мин.
|
< 2 ppb
|
0–150 ppb
|
Инкубатор, ридер; буферный раствор AFQ, положительный контроль
|
ДОН
|
ИФА
|
25 мин.
|
250 ppb
|
250–5000 ppb
|
Стандартные растворы ДОН, коньюгат, субстрат, остановочный раствор, концентрат промывочного раствора; ридер, микротитровальный планшет, воронки
|
ROSA
|
10 мин.
|
< 250 ppb
|
0–6 ppm
|
Буферный раствор ДОН, положительный контроль; инкубатор, ридер
|
Зеараленон
|
ИФА
|
25 мин.
|
25 ppb
|
25–1000 ppb
|
Стандартные растворы зеараленона, коньюгат, субстрат, остановочный раствор; ридер, микротитровальный планшет, таймер
|
ROSA
|
10 мин.
|
< 10 ppb
|
0–300 ppb
|
Буферный раствор AFQ, положительный контроль; инкубатор, ридер
|
Охратоксин
|
ИФА
|
25 мин.
|
2 ppb
|
2–40 ppb
|
Стандартные растворы охратоксина, коньюгат, субстрат, остановочный раствор; ридер, микротитровальный планшет, таймер
|
ROSA
|
10 мин.
|
< 1 ppb
|
0–12 ppb
|
Буферный раствор охратоксина, положительный контроль; инкубатор, ридер
|
T2-токсин
|
ИФА
|
25 мин.
|
75 ppb
|
75–500 ppb
|
Стандартные растворы T2, коньюгат, субстрат, остановочный раствор; ридер, микротитровальный планшет, таймер
|
ROSA
|
10 мин.
|
< 10 ppb
|
0–250 ppb
|
Буферный раствор T2-HT2, положительный контроль; инкубатор, ридер
|
Фумонизин
|
ИФА
|
25 мин.
|
250 ppb
|
250–5000 ppb
|
Стандартные растворы фумонизина, коньюгат, субстрат, останавливающий раствор; ридер, микротитровальный планшет, таймер
|
ROSA
|
10 мин.
|
< 250 ppb
|
0–6 ppm
|
Буферный раствор фумонизина, положительный контроль; инкубатор, ридер
|
Из приведенной сравнительной таблицы видно, что метод ИФА занимает больше времени и требует большего количества оборудования и реактивов по сравнению методом ROSA-теста, что делает последний более экспрессным, удобным при проведении анализов «на местах».
Для определения микотоксинов в производственных лабораториях различными производителями компанией Charm разработаны специальные наборы, в комплект которых входят все необходимые реагенты, стандарты и оборудование.
ROSA на сегодняшний день является лучшим тестом, который способен быстро определить микотоксины.
Для работы с ним требуется минимум базисного оборудования — тест-полоски, инкубатор и ридер Принцип работы: на тест-полоску добавляется подготовленный экстракт образца, после чего образец помещается в термостат или инкубатор. Затем получаем наглядный результат, позволяющий определить наличие микотоксинов визуально. Оценку количественных результатов тестирования проводят с помощью ROSA-ридера.
Результаты определения микотоксинов могут оцениваться как визуально, так и спектрофотометрически.
Зрительный качественный результат позволяет определить микотоксины через 3 мин. методом сравнения тестовой линии с контрольной. Также с помощью отдельных тест-полосок можно произвести количественный подсчет, сравнив две тестовые линии с контрольной на основании контрольной шкалы.
Спектрофотометрический метод определения микотоксинов основан на измерении количества интенсивности тестовой линии. Ридер выводит результат в виде числового значения.
С ROSA-тестом Вы получите качественное безопасное зерно для переработки и потребления.